Культура животных клеток. Методы (Конки Д., Эрба Э., Фрешни Р. и др.)

Культура животных клеток. Методы

Автор(ы):Конки Д., Эрба Э., Фрешни Р. и др.
03.03.2015
Год изд.:1989
Описание: Книга коллектива авторов из Великобритании, Италии, ФРГ и США — современное практическое руководство по культивированию животных клеток и тканей. Представлены новейшие разработки в этой области, актуальные для различных направлений экспериментальной биологии и медицины. Разделы сборника, посвященные методам элютриации и проточной цитометрии, заинтересуют в первую очередь исследователей, работающих в области молекулярной биологии клетки, а также биохимиков, цитологов и других специалистов, использующих метод культуры клеток и тканей.
Оглавление:
Культура животных клеток. Методы — обложка книги. Обложка книги.
От переводчика [5]
Предисловие [7]
Список авторов [8]
Список сокращений [9]
Глава 1. Введение. Принципы стерильной работы и ведение клеток в культуре. Р. Фрешни [10]
  1. Введение [10]
  2. Биология клеток в культуре [10]
    2.1. Происхождение и характеристика [10]
    2.2. Дифференцировка [12]
  3. Выбор материала [13]
    3.1. Органная культура или культура клеток? [13]
    3.2. Источник ткани [14]
    3.3. Субкультивирование [16]
    3.4. Выбор среды [17]
    3.5. Газовая фаза [19]
    3.6. Субстрат [19]
  4. Подготовка [20]
    4.1. Субстрат [20]
    4.2. Среда [21]
    4.3. Клетки [22]
  Литература [25]
Глава 2. Разработка химически-определенных бессывороточных сред для клеток млекопитающих. Г. Маурер [27]
  1. Введение [27]
  2. Роль сыворотки при культивировании клеток [27]
    2.1. Роль компонентов сыворотки [27]
    2.2. Возможные преимущества использования бессывороточных сред и сред с низким содержанием сыворотки [40]
    2.3. Некоторые недостатки использования сыворотки при культивировании клеток [40]
    2.4. Возможные недостатки использования бессывороточных сред [41]
    2.5. Для чего нужна бессывороточная среда? [41]
  3. Замена сыворотки в среде [42]
    3.1. Общий подход [42]
    3.2. Факторы, рассматриваемые перед выбором среды [42]
  4. Практические советы для выбора среды и работы с ней [48]
    4.1. Общие правила и предостережения [48]
    4.2. Стратегии оптимизации сред [49]
  5. Коммерческие препараты сред для оптимизации условий роста клеток млекопитающих [51]
  6. Методы покрытия поверхности культуральной посуды биоматриксом [52]
    6.1. Покрытие поверхности культуральной посуды поли-D-лизином [52]
    6.2. Выделение коллагена и покрытие поверхности культуральной посуды [53]
    6.3. Покрытие поверхности культуральной посуды фибронектином [53]
  Литература [54]
Глава 3. Наращивание клеток животных в культуре. Б. Гриффитс [56]
  1. Введение [56]
  2. Общие методы и параметры культур [57]
    2.1. Определение количества клеток [57]
    2.2. Оборудование и реагенты [58]
    2.3. Практические советы [61]
    2.4. Кинетика роста [62]
    2.5. Среда и питательные вещества [63]
    2.6. pH [65]
    2.7. Кислород [67]
    2.8. Типы культуральных систем [72]
  3. Монослойные культуры [74]
    3.1. Введение [74]
    3.2. Прикрепление клеток [76]
    3.3. Наращивание клеток; этап 1, вращающиеся бутыли [78]
    3.4. Наращивание клеток; этап 2, модификации вращающихся бутылей [79]
    3.5. Наращивание клеток; этап 3. стационарные культуры большой емкости [81]
    3.6. Наращивание клеток; этап 4, системы ферментеров [83]
    3.7. Заключение [94]
  4. Суспензионные культуры [94]
    4.1. Адаптация к суспензионной культуре [94]
    4.2. Статические суспензионные культуры [96]
    4.3. Небольшие суспензионные культуры [97]
    4.4. Факторы, определяющие процесс наращивания клеток [97]
    4.5. Ферментёры с перемешиванием [100]
    4.6. Проточные культуры [102]
    4.7. Ферментёр с эрлифтом [105]
    4.8. Инкапсулированные клетки [105]
  Литература [107]
Глава 4. Сохранение и оценка качества клеток. Р. Хэй [108]
  1. Введение [108]
  2. Создание банка линий клеток [108]
  3. Замораживание клеток и оценка выхода [110]
    3.1. Оборудование [111]
    3.2. Подготовка и замораживание [114]
    3.3. Размораживание и оценка выхода клеток [115]
  4. Определение качества клеточных линий [118]
    4.1. Контроль [118]
    4.2. Тесты на микробное заражение [126]
    4.3. Тесты на заражение клеточных культур клетками другого вида [137]
    4.4. Идентификация тканей, из которых получены линии клеток [147]
    4.5. Идентификация и количественная оценка иммунологических продуктов [155]
  5. Банки данных о происхождении клеток [162]
    5.1. Банк данных по гибридомам CODATA-IUIS [163]
    5.2. MIRDAB [163]
  6. Благодарности [164]
  Литература [164]
Глава 5. Разделение жизнеспособных клеток элютриацией. Д. Конки [166]
  1. Введение [166]
  2. Методы разделения клеток [166]
  3. Элютриатор [168]
    3.1. Элютриаторный ротор [168]
    3.2. Элютриационная камера [170]
    3.3. Перистальтический насос и дополнительная аппаратура [171]
    3.4. Полная система элютриации [172]
  4. Технический протокол [173]
    4.1. Стерилизация аппаратуры [173]
    4.2. Калибровка скорости тока [174]
    4.3. Загрузка образца [174]
    4.4. Элютриация дискретных клеточных популяций [175]
  5. Сбор клеток и интерпретация данных [177]
    5.1. Гетерогенные клеточные популяции (достижение чистоты клеточных фракций) [177]
    5.2. Постоянные линии клеток (выход и жизнеспособность) [177]
  6 Дальнейшие перспективы [180]
  7. Благодарности [180]
  Литература [180]
Глава 6. Проточная цитометрия. Л. Мораска и Э. Эрба [182]
  1. Введение [182]
  2. Сборка оборудования [183]
    2.1. Ortho Diagnostic Sistems Inc. Ортоцитофлуорограф US (Ortho Cytofluorograf) [184]
    2.2. Клеточный coprep с активируемой флуоресценцией FACS 440 фирмы Becton Dickinson [189]
  3. Вывод данных [194]
    3.1. Описательные цитограммы [195]
    3.2. Гистограммы [195]
    3.3. Компьютерный анализ данных [195]
  4. Подготовка образцов [197]
    4.1. Суспензии клеток из различных тканей [197]
  5. Примеры типов исследований [201]
    5.1. Светорассеяние неокрашенных клеток [201]
    5.2. Процедура окрашивания [202]
    5.3. Применение процедур окрашивания [206]
    5.4. Метод флуоресцентных антител с использованием флуоресценна [208]
  6. Обсуждение [209]
  7. Благодарности [211]
  Литература [211]
Глава 7. Органная культура. И. Ласнитски [214]
  1. Введение [214]
  2. Обзор техники органной культуры [214]
    2.1. Использование в качестве субстрата сгустка плазмы [215]
    2.2. Использование агара в качестве субстрата [215]
    2.3. Методы плотика [216]
    2.4. Метод сеток [216]
    2.5. Чередование культивирования эксплантатов в среде и газовой фазе [217]
  3. Техника часовых стекол [217]
    3.1. Получение эмбрионального экстракта [218]
    3.2. Получение куриной плазмы [219]
    3.3. Получение эксплантатов [219]
  4. Техника одиночного предметного стекла (метод Максимова) [223]
    4.1. Материалы [223]
    4.2. Приготовление культуры [223]
    4.3. Смена среды [224]
  5. Техника агарового геля [225]
    5.1. Техника эмбриологических часовых стекол [225]
  6. Культура эмбрионов для тератологических исследований [228]
    6.1. Получение эксплантатов [228]
    6.2. Газовая смесь [229]
    6.3. Среда [229]
    6.4. Схема эксплантации [229]
  7. Техника сеток [230]
    7.1. Материалы [231]
    7.2. Получение эксплантатов [233]
    7.3. Среда [235]
    7.4. Эксплантация [235]
    7.5. Инкубация и перфузия [236]
    7.6. Смена среды [237]
  8. Длительное культивирование взрослых тканей человека [238]
    8.1. Эксплантация и культивирование [239]
    8.2. Среда [239]
    8.3. Инкубация [240]
    8.4. Смена среды [242]
  9. Подготовка органных культур для световой микроскопии [242]
    9.1. Материалы [242]
    9.2. Фиксация и обезвоживание препаратов [242]
    9.3. Методы окрашивания [243]
  10. Радиоавтография [248]
    10.1. Обработка мечеными препаратами [249]
    10.2. Фиксация [249]
    10.3. Обезвоживание и заключение [249]
    10.4. Процедура заливки [249]
  11. Количественная оценка результатов [252]
  12. Преимущества и недостатки органной культуры [253]
  Литература [254]
Глава 8. Тесты на цитотоксичность и жизнеспособность. Э. Вилсон [256]
  1. Введение [256]
  2. Общие сведения [257]
  3. Специфические методы [258]
    3.1. Методы культивирования [259]
  4. Концентрации лекарственных веществ [264]
  5. Продолжительность воздействия лекарственного препарата [265]
  6. Восстановительный период [268]
  7. Конечный результат [268]
    7.1. Цитотоксичность, жизнеспособность и выживаемость [268]
    7.2. Цитотоксичность и жизнеспособность [269]
    7.3. Выживаемость (репродуктивная целостность) [273]
  8. Сравнение систем исследования [276]
  9. Технические советы [276]
    9.1. Лекарственные препараты и их растворы [276]
    9.2. Инкубация с лекарствами [280]
    9.3. Тесты, основанные на определении выживаемости и пролиферативной способности [280]
    9.4. Методы определения цитотоксичности [287]
  10. Интерпретация результатов [294]
    10.1. Взаимосвязь между количеством клеток и индексом цитотоксичности [294]
    10 2. Кривые зависимости полученных результатов от концентрации [294]
  11. Трудности метода и их преодоление [297]
    11.1. Большое среднеквадратичное отклонение [298]
    11.2. Различия между опытами [298]
    11.3. Стимуляция выше контрольного уровня [298]
    11.4. Сравнение цитотоксичности и противоопухолевой активности [300]
  12. Автоматизация [300]
  13. Дальнейшие перспективы [301]
  Литература [302]
Глава 9. Локализация с помощью радиоавтографии специфических последовательностей клеточных РНК, гибридизированных in situ с меченными тритием зондами. Д. Конки [304]
  1. Введение [304]
    1.1. Принцип [304]
    1.2. Преимущества гибридизации in situ [304]
  2. Основные требования [305]
    2.1. Избыточность последовательности [305]
    2.2. Чистота зондов [305]
    2.3. Удельная активность зондов [306]
    2.4. Чувствительность [306]
    2.5. Усиление сигнала [307]
    2.6. Эффективность радиоавтографии [308]
  3. Подготовка реагентов и материалы [308]
    3.1. Материалы [308]
    3.2. Основные реагенты [308]
    3.3. Реагенты для гибридизации [309]
    3.4. Радиоавтография [309]
  4. Подробный протокол. Гибридизация in situ [309]
    4.1. Гибридизация in situ [309]
  5. Радиоавтография [311]
    5.1. Радиоавтография с пленкой Кодак AR-10 [312]
    5.2. Окрашивание радиоавтографов с пленкой [312]
    5.3. Радиоавтография с жидкой эмульсией [313]
    5.4. Окраска радиоавтографов, покрытых жидкой эмульсией [313]
  6. Выявление молекулярных гибридов на цитологических препаратах с помощью методов, не использующих радиоактивную метку [314]
  7. Благодарности [315]
  Литература [315]
Приложение [316]
  Общие реагенты [316]
    Сбалансированный солевой раствор Хэнкса (модифицированный) [316]
    Фосфатный солевой буфер в модификации Дюльбекко раствор А (ФСБА без Са2+ и Mg2+) [316]
    Сбалансированный солевой раствор для препарирования [317]
    ФСБА/ЭДТА [317]
    Трипсин [317]
Предметный указатель [318]
Формат: djvu
Размер:2921585 байт
Язык:РУС
Рейтинг: 726 Рейтинг
Открыть: Ссылка (RU)