Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение

Автор(ы):Ригетти П.
16.03.2015
Год изд.:1986
Описание: Монография итальянского исследователя посвящена одному из самых эффективных современных методов разделения и анализа белков. Рассмотрены теория и принципы метода, его возможности и ограничения, дана характеристика амфолитов-носителей, колонок и аппаратуры, приведено подробное описание конкретных методов анализа и разделения белков методом изоэлектрофокусирования (ИЭФ), а также сочетания ИЭФ с ионообменными методами. Для молекулярных биологов, биохимиков, иммунологов и биологов других специальностей, занимающихся разделением и очисткой белков.
Оглавление:
Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение — обложка книги.
От переводчика [5]
Предисловие [8]
Список сокращений и условных обозначений [13]
Глава 1. Теория и важнейшие аспекты изоэлектрофокусирования [14]
  1.1. История метода [14]
  1.2. Принцип ИЭФ [18]
  1.3. Обобщение принципа ИЭФ [22]
  1.4. Книги и обзоры, посвященные ИЭФ [24]
  1.5. Теория и важнейшие аспекты ИЭФ [26]
    1.5.1. Искусственный градиент pH [27]
    1.5.2. Естественный (равновесный) градиент pH [27]
    1.5.3. Общее дифференциальное уравнение ИЭФ [28]
    1.5.4. Буферная емкость в изопротонном состоянии [29]
    1.5.5. Электропроводность в изопротонном состоянии [31]
    1.5.6. Принцип монотонного изменения pH [32]
    1.5.7. Разрешающая способность [33]
    1.5.8. Вместимость по числу пиков [35]
    1.5.9. Предельная загрузка белковой зоны [36]
    1.5.10. Условия образования плавного градиента pH [38]
  1.6. Синтез амфолитов торговых марок [42]
    1.6.1. Синтез амфолинов (фирма LKB) [44]
    1.6.2. Синтез сервалитов (фирма Serva) [48]
    1.6.3. Синтез фармалитов (фирма Pharmacia) [49]
  1.7. Лабораторный синтез амфолитов-носителей [51]
    1.7.1. Метод Виноградова — Ригетти [52]
    1.7.2. Метод Шарлионе и др. [55]
    1.7.3. Метод Джаста [57]
    1.7.4. Высокомолекулярные амфолиты Ригетти — Хьертена [59]
  1.8. Методы детектирования амфолитов-носителей [61]
  1.9. Фракционирование амфолитов-носителей [65]
  1.10. Основные свойства амфолитов-носителей [68]
    1.10.1. Молярность и ионная сила амфолитов-носителей [68]
    1.10.2. Изоэлектрическая и изоионная (изопротонная) точки [71]
    1.10.3. Молекулярная масса [72]
    1.10.4. Оптические свойства [75]
    1.10.5. Буферная емкость и электропроводность амфолинов, сервалитов и фармалитов [76]
    1.10.6. Распределение амфолитов-носителей при фокусировании. Общее число индивидуальных компонентов [79]
    1.10.7. Хелатирующие свойства [81]
    1.10.8. Биологическая токсичность [83]
    1.10.9. Растворимость амфолитов-носителей в различных растворителях [84]
    1.10.10. Регенерация амфолитов-носителей [85]
  1.11. Альтернативные способы формирования градиента pH [86]
    1.11.1. Амфолиты-носители на основе бактопептона [86]
    1.11.2. Тепловой градиент pH [86]
    1.11.3. Градиенты pH, возникающие при изменении диэлектрической проницаемости среды и на границе раздела фаз [88]
    1.11.4. Градиенты pH, образуемые вследствие диффузии буферов [89]
    1.11.5. Градиенты pH, образуемые смесями кислот, оснований и амфолитов [90]
    1.11.6. Градиент pH, образованный двумя-тремя амфолитами; моделирование при помощи ЭВМ [92]
    1.11.7. Иммобилизованные градиенты pH [95]
Глава 2. Препаративное изоэлектрофокусирование [97]
  2.1. Препаративное ИЭФ в жидкой среде [98]
    2.1.1. Колонки фирмы LKB [98]
    2.1.2. Колонки фирмы ISCO [98]
    2.1.3. Система Poly-Prep 200 [111]
    2.1.4. Колонки Свенссона (Рильбе) [113]
    2.1.5. Зонально-конвекционное ИЭФ по Вальмету [115]
    2.1.6. Зонально-конвекционное ИЭФ по Тальботу [117]
    2.1.7. Зонально-конвекционное ИЭФ по Денкла [118]
    2.1.8. Зонально-конвекционное ИЭФ в сплошной спирали [120]
    2.1.9. Зонально-конвекционное ИЭФ в «открытой» спирали [121]
    2.1.10. Жидкостное ИЭФ во вращающихся трубках по Хьертену [123]
    2.1.11. Многокамерные электролизеры [124]
    2.1.12. Высоковольтное ИЭФ в свободном потоке по Ханиигу [126]
    2.1.13. Высоковольтное ИЭФ в свободном потоке по Джасту и Вернеру [127]
    2.1.14. Высоковольтное ИЭФ в свободном потоке по Прусику [129]
    2.1.15. Циклическое ИЭФ в непрерывном потоке [130]
    2.1.16. Проточное ИЭФ в градиенте плотности [131]
    2.1.17. Стационарный реоэлектролиз [134]
  2.2. Препаративное ИЭФ в гелях [137]
    2.2.1. Проточное ИЭФ по Фоусетту [137]
    2.2.2. Проточная разделительная камера Квормби [138]
    2.2.3. ИЭФ в гранулированных гелях (не проточное) [141]
    2.2.4. ИЭФ в многофазных колонках [146]
    2.2.5. ИЭФ в цилиндрических полиакриламидных гелях [148]
    2.2.6. ИЭФ в пластинах полиакриламидного и агарозного гелей [150]
    2.2.7. Хроматофокусирование и амфолит-вытеснительная хроматография [151]
    2.2.8. Заключительные замечания. О максимальной загрузке образцом [156]
Глава 3. Аналитическое изоэлектрофокусирование [159]
  3.1. ИЭФ в градиенте плотности с использованием небольших колонок [160]
  3.2. Аналитическое ИЭФ в гелях [163]
    3.2.1. Строение агарозной матрицы [164]
    3.2.2. Структура и свойства полиакриламидных гелей [166]
    3.2.3. Высокосшитые гели. Применение различных типов сшивающих агентов [173]
    3.2.4. ИЭФ в тонких агарозных пластинах [176]
    3.2.5. ИЭФ на ацетилцеллюлозных пленках [182]
    3.2.6. ИЭФ в тонком слое гранулированного геля [183]
    3.2.7. ИЭФ в полиакриламидных гелях [184]
    3.2.8. Состав геля [185]
    3.2.9. Полимеризация геля [187]
    3.2.10. Выбор электродных растворов [190]
    3.2.11. ИЭФ в пластинах ПААГ [192]
    3.2.12. Готовые пластины геля [202]
    3.2.13. ИЭФ в ультратонких полиакриламидных гелях [202]
    3.2.14. Внесение образца при ИЭФ в плоских и цилиндрических гелях [207]
    3.2.15. Высушивание гелей [210]
    3.2.16. ИЭФ в цилиндрических гелях [211]
    3.2.17. Микро-ИЭФ [213]
    3.2.18. ИЭФ при минусовых температурах [215]
  3.3. Методы детектирования белков в гелях [217]
    3.3.1. Способы окрашивания [217]
    3.3.2. Окрашивание серебром [221]
    3.3.3. Денситометрирование сфокусированных зон [226]
    3.3.4. Радиоавтография и флюорография [230]
    3.3.5. Иммунологические методы [237]
    3.3.6. Специфические методы окраски и метод зимограмм [239]
  3.4. Методы двумерного фракционирования [248]
    3.4.1. ИЭФ—иммуноэлектрофорез (или иммунофиксация) [250]
    3.4.2. ИЭФ—обычный электрофорез в геле [254]
    3.4.3. ИЭФ—электрофорез в градиентном геле [255]
    3.4.4. Изоэлектрофокусирование — изотахофорез (ИЭФ — ИТФ) [256]
    3.4.5. ИЭФ в «поперечном» градиенте концентрации мочевины [256]
    3.4.6. ИЭФ—электрофорез в ДДС-Na [258]
  3.5. Предстационарное ИЭФ (TRANSIEF) [267]
  3.6. Обнаружение мутаций, приводящих к замене одной нейтральной аминокислоты на другую [269]
  3.7. Кривые титрования [273]
Глава 4. Общие экспериментальные аспекты [281]
  4.1. Изоэлектрическая преципитация [281]
  4.2. Некоторые «добавки» при ИЭФ [286]
  4.3. Внесение образца [292]
  4.4. Выбор градиента pH. Получение узких градиентов pH [296]
  4.5. Измерение градиента pH [301]
  4.6. Удаление амфолитов-носителей после ИЭФ [307]
  4.7. Возможные модификации белков в ходе ИЭФ [309]
  4.8. Источники питания [311]
  4.9. Катодный дрейф [312]
  4.10. Неполадки и их устранение [316]
  4.11. Артефакты. Общий анализ [319]
Глава 5. Некоторые применения метода ИЭФ [328]
  5.1. ИЭФ пептидов [328]
  5.2. ИЭФ клеток, субклеточных частиц, бактерий и вирусов [335]
  5.3. ИЭФ ферритинов [342]
  5.4. ИЭФ гемоглобинов [347]
  5.5. Иммобилины с этим справятся! [363]
Литература [369]
Предметный указатель [393]
Формат: djvu
Размер:14286103 байт
Язык:РУС
Рейтинг: 374 Рейтинг
Открыть: