Методы культуры клеток для биохимиков (Адамс Р.)

Методы культуры клеток для биохимиков

Автор(ы):Адамс Р.
06.10.2007
Год изд.:1983
Описание: В книге английского ученого описываются различные аспекты культивирования клеток: типы клеток млекопитающих, используемые реактивы, оборудование и аппаратура, получение и диспергирование клеток; подробно изложены методы получения клеточных культур из различных тканей, способы культивирования, методы синхронизации клеток, рассмотрены клеточные гибриды и мутанты, взаимоотношения между вирусами и клеточными культурами, дифференцировка клеток в условиях культивирования.
Оглавление:
Методы культуры клеток для биохимиков — обложка книги. Обложка книги.
Предисловие редактора перевода [5]
Благодарности [6]
Глава 1. Введение [7]
  1.1. Основы [7]
  1.2. Некоторые преимущества [8]
  1.3. Применения [10]
    1.3.1. Дифференцировка [10]
    1.3.2. Генетика [11]
    1.3.3. Иммунология [12]
    1.3.4. Гормоны [12]
    1.3.5. Образование клеточных продуктов [13]
    1.3.6. Вирусология и трансформация клеток [14]
    1.3.7. Определение цитотоксичности [15]
  1.4. Культура растительной ткани [16]
Глава 2. Характерные особенности культивируемых клеток [18]
  2.1. Первичные клетки и трансформация [18]
  2.2. Потребности в питательных веществах [20]
  2.3. Контроль роста [22]
    2.3.1. Клеточный цикл и цикл роста [22]
    2.3.2. Зависимость от прикрепления и рост в суспензии [23]
    2.3.3. Регуляция, зависящая от плотности культуры (контактное торможение) [24]
    2.3.4. Клеточная мембрана [25]
  2.4. Дифференцировочные функции в культуре клеток [27]
  2.5. Фирмы-поставщики и транспортирование [28]
Глава 3. Посуда, используемая при культивировании [30]
  3.1. Выбор посуды [30]
    3.1.1. Газовый обмен [30]
    3.1.2. Закупоренные сосуды [30]
    3.1.3. Техника перфузии [31]
  3.2. Монослойные культуры [32]
    3.2.1. Мелкомасштабные культуры [32]
    3.2.2. Культуры промежуточного масштаба [34]
    3.2.3. Крупномасштабные культуры [34]
  3.3. Суспензионные культуры [39]
  3.4. Микроносители [40]
Глава 4. Подготовка посуды и техника стерилизации [44]
  4.1. Общие замечания [44]
    4.1.1, Процедура мытья [45]
    4.1.2, Бутыли и пипетки [45]
    4.1.3, Резиновые пробки [46]
    4.1.4, Моечные машины [46]
  4.2. Методы стерилизации [46]
    4.2.1. Горячий воздух [46]
    4.2.2. Автоклавирование [47]
    4.2.3. Контроль стерилизации [48]
    4.2.4. Фильтрование [48]
Глава 5. Пересев [52]
  5.1. Техника диссоциации [52]
    5.1.1. Трипсин [52]
    5.1.2. Проназа [53]
    5.1.3. Коллагеназа [53]
    5.1.4. Версен (ЭДТА) [54]
    5.1.5. Механические методы [55]
  5.2. Пересев Клеточного моноСлоя [56]
    5.2.1. Подсчет живых клеток [56]
    5.2.2. Проверка на бактериальное заражение [57]
  5.3. Цикл роста [57]
Глава 6. Первичные клетки [60]
  6.1. Введение [60]
  6.2. Лимфоциты [60]
    6.2.1. Выделение лейкоцитов и аутологичной плазмы [60]
    6.2.2. Очистка лимфоцитов [61]
    6.2.3. Метод очистки на колонке со стеклянными бусами [61]
    6.2.4. Метод градиентного центрифугирования [62]
    6.2.5. Культивируемые лимфоциты [63]
    6.2.6. Разделение Т- и В-лимфоцитов [64]
  6.3. Биопсия кожи человека [65]
  6.4. Первичные клетки почки [66]
  6.5. Культуры мышиных макрофагов [68]
  6.6. Клетки скелетных мышц крысы или цыпленка [68]
  6.7. Культуры клеток мышиного эмбриона [69]
  6.8. Клетки куриного эмбриона [70]
  6.9. Клетки печени куриных эмбрионов [71]
  6.10. Культура клеток двукрылых [72]
Глава 7. Среды для культуры клеток [74]
  7.1. Введение [74]
  7.2. Сбалансированные долевые растворы [75]
    7.2.1. Цвиттерионные буферы [77]
  7.3. Среда Игла [78]
    7.3.1. Сухие среды [79]
  7.4. Более усложненные, среды [80]
  7.5. Простые среды с неидентифицированными добавками [81]
  7.6. Антибиотики [81]
  7.7. Сыворотка [82]
    7.7.1. Удаление из сыворотки маленьких молекул [82]
    7.7.2. Роль сыворотки [84]
  7.8. Другие природные добавки [89]
  7.9. Среды для культивирования клеток насекомых [89]
Глава 8. Методы [89]
  8.1. Клонирование клеток и эффективность посева [89]
    8.1.1. Простые методы клонирования или определения эффективности посева [89]
    8.1.2. Капиллярный метод [91]
    8.1.3. Клонирование под агаром [91]
    8.1.4. Клонирование на фидерном слое [92]
  8.2. Методы счета клеток [93]
    8.2.1. Гемоцитометр [93]
    8.2.2. Электронный счетчик клеток [94]
    8.2.3. Сравнение методов [97]
  8.3. Хранение клеток [98]
    8.3.1. Процедура замораживания [99]
    8.3.2. Размораживание клеток после хранения в жидком азоте [101]
    8.3.3. Организация стоков замороженных клеток [101]
  8.4. Кариотипирование [102]
    8.4.1. Приготовление хромосом для анализа [102]
    8.4.2. Кариотипирование [103]
    8.4.3. Q-сегментация [105]
    8.4.4. О-сегментация [105]
  8.5. Визуализация клеток [106]
    8.5.1. Фазово-контрастная микроскопия [107]
    8.5.2. Флуоресцентная микроскопия [108]
Глава 9. Бактериальные загрязнения [109]
  9.1. Бактериальные загрязнения [109]
    9.1.1. Стеклянная и пластиковая посуда [109]
    9.1.2. Клетки [109]
    9.1.3. Среда [109]
  9.2. Проверка стерильности [110]
  9.3. Анализ бактериальных загрязнений [111]
  9.4. Загрязнения из воздуха [112]
    9.4.1. Асептическая техника [112]
    9.4.2. Системы с ламинарным током воздуха [114]
  9.5. Антибиотики [114]
  9.6. Удаление загрязненного материала [115]
  9.7. Микоплазмы [115]
    9.7.1. Влияние на культуры клеток [116]
    9.7.2. Культуры микоплазм [116]
  9.8. Окрашивание микоплазмы [118]
    9.8.1. Окрашивание орсеином [118]
    9.8.2. Радиоавтография [118]
    9.8.3. Флуоресцентное окрашивание [119]
  9.9. Удаление микоплазмы [120]
  9.10. Вирусное загрязнение [121]
Глава 10. Клеточный цикл [123]
  10.1. Описание [123]
  10.2. Митоз [123]
  10.3. Фаза S [124]
  10.4. Контроль клеточного цикла [127]
  10.5. Распределение клеток по циклу [130]
  10.6. Пролиферативный пул [132]
  10.7. Анализ клеточного цикла [133]
    10.7.1. Метод импульсного включения тритированного тимидина [133]
    10.7.2. Метод непрерывного мечения [134]
    10.7.3. Функции накопления [136]
    10.7.4. Графический анализ [138]
    10.7.5. Проточная микрофлуориметрия [140]
  10.8. Яды, облучение и клеточный цикл [142]
    10.8.1. Фаза S [142]
    10.8.2. Фаза Q2 [142]
    10.8.3. Фаза G1 [144]
  10.9. Тимидинкиназа и моделирование клеточного цикла на ЭВМ [144]
Глава 11. Синхронизация клеток [146]
  11.1. Введение [146]
  11.2. Отбор митотических клеток [146]
    11.2.1. Встряхивание [147]
    11.2.2. Трипсинизация [148]
  11.3. Избирательная гибель клеток в одной из фаз клеточного цикла [148]
  11.4. Отбор клеток по размеру [149]
    11.4.1. Отбор клеток в электронном счетчике [149]
    11.4.2. Зональное центрифугирование [150]
  11.5. Синхронизация пересевом [152]
  11.6. Недостаточное содержание сыворотки [154]
  11.7. Голодание по изолейцину [155]
  11.8. Блокирование фазы S [156]
    11.8.1. Действие аминоптерина и аметоптерина (метотрексата) [157]
    11.8.2. Действие 5-фтордезоксиуридина [159]
    11.8.3. Действие высоких концентраций тимидина [159]
    11.8.4. Действие гидроксимочевины [160]
  11.9. Индукция синхронизации на границе фаз G1/6 [160]
    11.9.1. Голодание по изолейцину и гидроксимочевина [160]
    11.9.2. Клетки в стационарной фазе и аминоптерин [161]
    11.9.3. Двойной тимидиновый блок [161]
    11.9.4. Сравнение методов [161]
  11.10. Синхронизация в фазе G2 [162]
Глава 12. Использование радиоактивных изотопов в клеточной культуре [163]
  12.1. Определение скоростей синтеза ДНК [163]
    12.1.1. Решение проблемы [167]
    12.1.2. Применение к суспензионным культурам [172]
  12.2. Оценка скоростей синтеза РНК и белка [173]
  12.3. Радиоавтография [174]
    12.3.1. Эмульсии [174]
    12.3.2. Отделяемые пленки [175]
    12.3.3. Жидкая эмульсия [176]
    12.3.4. Радиоавтография в чашках [177]
    12.3.5. Значимость подсчета числа зерен [177]
    12.3.6. Фоновое число зерен [179]
    12.3.7. Радиоавтография водорастворимых компонентов [179]
  12.4. Репарация ДНК [181]
    12.4.1. Ультрафиолетовое облучение [182]
    12.4.2. Изменение репаративного синтеза [182]
Глава 13. Клеточные мутанты и гибридные клетки [183]
  13.1. Ауксотрофные мутанты [183]
  13.2. Отбор мутантов [184]
    13.2.1. Процедура выделения ТК-мутантов [187]
  13.3. Температурочувствительные мутанты [187]
  13.4. Посев реплик животных клеток [188]
  13.5. Гибридизация соматических клеток [189]
    13.5.1. Слияние клеток с помощью вируса Сендаи [191]
    13.5.2. Слияние клеток BHR21/C13 с эритроцитами кур с использованием вируса Сендай [192]
    13.5.3. Слияние клеток с помощью лизолецитина [193]
    13.5.4. Слияние клеток с использованием полиэтиленгликоля [193]
  13.6. Межклеточные связи [194]
    13.6.1. Подсчет числа зерен н межклеточные связи [195]
Глава 14. Вирусы [196]
  14.1. Введение [196]
    14.1.1. Классификация вирусов животных [197]
    14.1.2. Предосторожности при работе с зараженными вирусами клетками [197]
  14.2. Получение вирусов [199]
    14.2.1. Процедура получения вируса герпеса простого, вируса псевдобешенства или вируса энцефаломиокардита [199]
    14.2.2. Процедура для получения вируса SV40 [200]
    14.2.3. Одноэтапный рост SV40 [201]
    14.2.4. Вирус Сендай — получение и инактивация [202]
  14.3. Обнаружение вирусов [203]
    14.3.1. Метод подсчета бляшек [204]
    14.3.2. Метод флуоресцирующих антител [208]
    14.3.3. Гемагглютинация [211]
  14.4. Трансформация клеток вирусом [212]
    14.4.1. Методы трансформации [212]
Глава 15. Дифференцировка в культурах клеток [214]
  15.1. Эритроидная дифференцнровка клеток Френд [214]
    15.1.1. Индукция синтеза глобина в клетках Френд [215]
  15.2. Кожа и кератиноциты [215]
  15.3. Клетки тератокарцнномы [217]
  15.4. Культуры миеломных клеток и образование антител [219]
  15.5. Дифференцировка мышечных клеток [220]
  15.6. Днфференцнровка жировых клеток [221]
Глава 16. Приложения [222]
Приложение 1. Составы сред [222]
Приложение 2. Красители и фиксаторы [235]
Приложение 3. Фирмы, поставляющие приборы и реактивы [236]
Приложение 4. Проверка стерильности [238]
Приложение 5. Испытания [240]
Приложение 6. Сокращения [242]
Литература [244]
Предметный указатель [256]
Формат: djvu
Размер:8701430 байт
Язык:РУС
Рейтинг: 476 Рейтинг
Открыть: Ссылка (RU)