Анализ генома. Методы

Автор(ы):Дейвис К.
06.10.2007
Год изд.:1990
Описание: "Сборник молекулярно-биологических методов, используемых при изучении генома человека, написанный коллективом авторов из США и Великобритании. Изложению каждого метода предшедствует краткое теоретическое введение, что делает книгу доступной для начинающих исследователей. Описаны методы трансфекции эукариотических клеток".
Оглавление:
Анализ генома. Методы — обложка книги.
От редакции [5]
Предисловие [6]
Список сокращений [7]
Глава 1. Методы переноса генетического материала в клетки млекопитающих. П. Гудфеллоу, К. Притчард, Г. Бантинг [8]
  1. Введение [8]
  2. Общие положения [10]
    2.1. Необходимые условия [10]
    2.2. Селекция [11]
  3. Слияние целых клеток [13]
    3.1. Введение [13]
    3.2. Получение клеточных гибридов с помощью слияния, индуцированного ПЭГ (основная методика) [13]
    3.3. Возможные ошибки и варианты [14]
  4. Перенос генов с помощью мини-клеток (MMGT) [16]
    4.1. Введение [16]
    4.2. Метод MMGT [17]
    4.3. Очистка мини-клеток [20]
    4.4. Возможные ошибки и варианты методики [21]
  5. Перенос генов, опосредованный хромосомами (CMGT) [22]
    5.1. Введение [22]
    5.2. Выделение хромосом [23]
    5.3. Перенос хромосом [24]
    5.4. Предварительная селекция [25]
    5.5. Возможные ошибки и варианты методики [25]
  6. Перенос генов, опосредованный ДНК [26]
    6.1. Введение [26]
    6.2. Транфекция ДНК с использованием фосфата кальция [27]
    6.3. Совместный перенос (котраинфекция) и предварительная селекция [28]
    6.4. Возможные ошибки и варианты методики [28]
  7. Заключение [29]
      Литература [29]
Глава 2. Рестрикциоиное картирование. А. Колсон, Дж. Салстон [31]
  1. Введение [31]
  2. Стратегия [31]
    2.1. Сравнение клонов [31]
    2.2. Векторы [32]
    2.3. Селекция клонов [33]
  3. Экспериментальная часть [33]
    3.1. Создание библиотеки [33]
    3.2. Анализ клонов [37]
    3.3. Обработка результатов [46]
    3.4. Окончательное заполнение карты (закрытие карты) [50]
  4. Заключение [55]
    4.1. Карта С. elegans [55]
    4.2. Картирование других организмов [55]
  5. Прописи растворов [56]
      Литература [57]
Глава 3. Пульс-электрофорез и методы работы с большими молекулами ДНК. К. Смит, С. Клко, Ч. Кантор [58]
  1. Введение [58]
  2. Приготовление образцов ДНК [58]
    2.1. Приготовление вставок с образцами ДНК простейших [67]
    2.2. Выделение ДНК из культивируемых клеток и лимфоцитов [68]
    2.3. Выделение ДНК из клеток прокариот [68]
    2.4. Выделение ДНК из клеток грибов [69]
    2.5. Выделение ДНК из растительных клеток [69]
  3. Работа с агарозными блок-вставками, содержащими образцы ДНК [70]
    3.1. Ферментативная обработка [70]
  4. Пульс-электрофорез (ПЭФ) [71]
    4.1. Заливка геля и нанесение образцов [72]
    4.2. Подбор эффективных условий разделения [74]
  5. Фотографирование, блотинг и гибридизация [78]
    5.1. Фотографирование и блотинг [79]
    5.2. Гибридизация [80]
  6. Приложение [81]
      Литература [93]
Глава 4. Прыжки по хромосоме. Ф. Коллинз [95]
  1. Введение [95]
  2. Область применения метода [96]
  3. Стандартные библиотеки «прыжков» [98]
    3.1. Типы «прыжков» [98]
    3.2. Принцип создания стандартных библиотек [99]
    3.3. Получение ДНК-фрагментов желаемого размера [101]
    3.4. Циклизация [104]
    3.5. Клонирование и скрининг [108]
    3.6. Анализ клонов [111]
    3.7. Последовательные «прыжки» [113]
  4. Специфические библиотеки «прыжков» [114]
    4.1. Принцип метода [114]
    4.2. Методика создания библиотеки [114]
  5. Библиотеки клонов-связок [116]
    5.1. Принцип конструирования [116]
    5.2. Методика получения NotI -библиотеки илонов-связок [116]
    5.3. Использование ДНК из сортированных хромосом [118]
  6. Возможные усовершенствования [118]
      Литература [121]
Глава 5. Обнаружение единичных иуклеотидных замен в ДНК: расщепление РНКазой и денатурирующий градиентный гель-электрофорез. Р. Майерс, В. Шеффилд, Д. Кокс [123]
  1. Введение [123]
  2. Общее описание методов [124]
    2.1. РНКазное расщепление [124]
    2.2. Денатурирующий градиентный гель-электрофорез [128]
    2.3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) [138]
  3. Предварительные процедуры [141]
  4. Полимеразная цепная реакция [141]
    4.1. Материалы [142]
    4.2. Методы [143]
  5. Метод РНКазного расщепления [144]
    5.1. Материалы [145]
    5.2. Методы [149]
  6. Денатурирующий градиентный гель-электрофорез [153]
    6.1. Гель-электрофоретическая система [153]
    6.2. Подготовительные эксперименты: перпендикулярно-градиентный и оптимизирующий электрофорезы [159]
    6.3. Приготовление зондов для анализа при помощи ДГГЭ [166]
    6.4. Обнаружение единичных нуклеотидных замен при помощи денатурирующего градиентного гель-электрофореза [173]
      Литература [174]
Глава 6. Полимеразная цепная реакция. Р. Сайки, У. Гиленстен, Г. Эрлих [176]
  1. Введение [176]
  2. Основные методики [178]
    2.1. Оборудование [178]
    2.2. Компоненты реакции [179]
    2.3. Параметры температурных циклов [180]
  3. Амплификация геномной последовательности «вручную» [182]
  4. Прямое секвенирование амплифицированных фрагментов ДНК [184]
    4.1. Секвенирование двухцепочечных образцов [186]
    4.2. Секвенирование одноцепочечных фрагментов ДНК [186]
  5. Заключение [189]
      Литература [189]
Глава 7. Геномная дактилоскопия. Р. Уэллс [191]
  1. Введение [191]
  2. Гибридизационные зонды для геномной дактилоскопии [192]
    2.1. Зонды на основе минисателлитов [192]
    2.2. М13 [196]
  3. Гель-электрофорез и перенос ДНК [199]
    3.1. Выбор фермента рестрикции [199]
    3.2. Приготовление образцов ДНК для электрофореза [200]
    3.3. Условия электрофореза [200]
    3.4. Перенос по Саузерну [201]
  4. Условия гибридизации и отмывки фильтров [201]
    4.1. Минисателлиты [202]
    4.2. Метод геномной дактилоскопии с использованием М13 [203]
    4.3. Радиоавтография [203]
    4.4. Удаление проб с найлоновых фильтров [204]
  5. Использование метода геномной дактилоскопии в анализе генетического сцепления [204]
    5.1. Обоснование метода [204]
    5.2. Статистические расчеты [206]
    5.3. Практические аспекты сегрегационного анализа [208]
  6. Другие применения метода геномных отпечатков [210]
    6.1. Определение структуры родословной [210]
    6.2. Сравнения в пределах одного организма [212]
      Литература [212]
Глава 8 Картирование сложно наследуемых признаков человека. Э. Ландер [214]
  1. Введение [214]
  2. Основы анализа сцепления [216]
  3. Карта генетического сцепления генома человека [218]
  4. Планирование анализа сцепления для болезней с простым типом наследования [219]
  5. Осложнения: неполная пенетрантность и ошибки клинической диагностики [220]
  6. Осложнения: генетическая гетерогенность и фенокопии [224]
  7. Осложнения: генетические взаимодействия [231]
  8. Полигенное наследование [233]
  9. Картирование редких рецессивных признаков [234]
  10. Заключение [235]
      Литература [237]
Предметный указатель [240]
Указатель латинских названий [243]
Формат: djvu
Размер:3988679 байт
Язык:RUS
Рейтинг: 317 Рейтинг
Открыть: