Аминокислоты, пептиды и белки
Автор(ы): | Дэвени Т., Гергей Я.
15.02.2014
|
Год изд.: | 1976 |
Описание: | Методическое руководство по биохимии и иммунохимии белка. Рассмотрены теоретические основы методов и современная аппаратура для гель-фильтрации, бумажной, ионнообменной и тонкослойной хроматографии, в том числе методы количественного аминокислотного анализа с помощью автоматических анализаторов. Подробно описан анализ производных аминокислот методом газовой хроматографии. Книга хорошо иллюстрирована и снабжена подробной библиографией. Предназначена для химиков, врачей-лаборантов, биохимиков, а также для биологов других специальностей (молекулярных биологов, вирусологов, физиологов, цито- и гистохимиков и т. п.). |
Оглавление: |
Обложка книги.
Предисловие к русскому изданию [5]Предисловие авторов [6] ГЛАВА I. НЕКОТОРЫЕ МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ АНАЛИТИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ БЕЛКОВ [7] А. Изучение нативных белков [7] 1. Электрофорез нативных белков [8] 2. Метод зонального электрофореза [10] 3. Изучение нативных белков иммунохимическими методами [15] 4. Ионообменная хроматография белков [21] 5. Фракционирование белков с помощью гель-фильтрации [23] 6. Мембранная фильтрация [27] Цитированная литература [30] Рекомендуемая литература [30] Б. Методологические вопросы анализа аминокислотной последовательности белков [31] Цитированная литература [43] Рекомендуемая литература [45] ГЛАВА II. АНАЛИЗ БЕЛКОВ С ПОМОЩЬЮ НИЗКОВОЛЬТНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА [46] A. Низковольтный электрофорез на бумаге [46] 1. Техника проведения электрофореза [46] 2. Методики окрашивания [54] 3. Количественная оценка результатов разделения белков при низковольтном электрофорезе на бумаге [60] 4. Некоторые источники ошибок при проведении низковольтного электрофореза на бумаге [66] 5. Определение содержания белка [66] Б. Электрофорез на ацетат-целлюлозной мембране [71] B. Электрофорез в агаровом геле [74] Приборы [74] Методика [74] Г. Электрофорез в крахмальном геле [78] 1. Вертикальный электрофорез в крахмальном геле [78] 2. Горизонтальный электрофорез в крахмальном геле [80] Д. Электрофорез в полиакриламидном геле [84] 1. Зональный электрофорез в полиакриламидном геле [84] 2. Диск-электрофорез [88] Цитированная литература [93] Рекомендуемая литература [93] ГЛАВА III. МЕТОДЫ СРЕДНЕ- И ВЫСОКОВОЛЬТНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА (М. ШАЙГО) [95] A. Аппарат для средневольтного горизонтального электрофореза и его использование [96] Б. Метод диагонального электрофореза [106] 1. Выделение пептидов, содержащих цистин [106] 2. Выделение пептидов, содержащих метионин [108] 3. Выделение пептидов, содержащих гистидин [110] 4. Выделение пептидов, содержащих лизин [111] 5. Выделение С-концевого пептида из триптического гидролизата белков [113] B. Метод высоковольтного электрофореза [113] Цитированная литература [115] Рекомендуемая литература [115] ГЛАВА IV. МЕТОДЫ ИММУНОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА [116] A. Получение иммунной сыворотки [116] 1. Схемы иммунизации без адъюванта [116] 2. Схемы иммунизации с адъювантами [118] Б. Анализ белков с помощью реакции преципитации [119] 1. Качественная реакция преципитации [119] 2. Определение титра преципитирующих антител по разведению антигена [121] 3. Определение зоны эквивалентности реакции антиген—антитело [123] 4. Реакция кольцепреципитации (реакция преципитации на границе слоев, содержащих антиген и антитела) [123] 5. Количественная реакция преципитации по Хайдельбергеру [125] B. Анализ белков методами диффузии в геле [127] 1. Метод простой линейной диффузии в геле по Удену [127] 2. Метод двойной (одномерной) линейной диффузии в геле [129] 3. Метод двумерной двойной диффузии в геле по Ухтерлони [131] 4. Иммуноэлектрофорез [137] 5. Сравнительный анализ белков по Оссерману [149] 6. Абсорбционный иммуноэлектрофорез [150] 7. Иммунная гель-фильтрация [152] 8. Электрофарез [154] 9. Качественный и количественный анализ белков с помощью электрофореза в геле агарозы, содержащем антитела [154] 10. Количественные методы иммунодиффузии [157] 11. Иммунодиффузионный анализ белков на ацетат-целлюлозных мембранах [161] Цитированная литература [163] Рекомендуемая литература [163] ГЛАВА V. ГИДРОЛИЗ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ [165] A. Подготовка исследуемого материала для гидролиза [165] 1. Окисление белков и пептидов надмуравьиной кислотой [165] 2. Восстановление и карбоксилирование белков и пептидов [166] Б. Гидролиз белков и пептидов в 6 н. НСl [166] B. Частичный кислотный гидролиз белков и пептидов [167] Г. Гидролиз белков и пептидов трипсином [168] Д. Гидролиз белков и пептидов химотрипсином [169] Е. Гидролиз белков и пептидов пепсином [169] Ж. Гидролиз белков и пептидов папаином [170] 3. Расщепление белков бромцианом [170] Рекомендуемая литература [172] ГЛАВА VI. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ С ПОМОЩЬЮ АВТОМАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТНЫХ АНАЛИЗАТОРОВ [173] Цитированная литература [186] ГЛАВА VII. ХРОМАТОГРАФИЯ АМИНОКИСЛОТ И ПЕПТИДОВ НА БУМАГЕ [187] Рекомендуемая литература [194] ГЛАВА VIII. ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ПЕПТИДОВ [195] A. Фракционирование кислых пептидов на колонке с амберлитом IR-4B [195] Б. Хроматография основных пептидов на колонке с амберлитом IRC-50 [196] B. Фракционирование пептидов на колонке с дауэксом 50 X 2 в нелетучих буферных растворах [197] Г. Фракционирование пептидов на колонке с дауэксом 50 X 2 в летучих буферных растворах [199] Д. Хроматография пептидов на колонке с КМ-целлюлозой [200] Е. Хроматография пептидов на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой [202] Рекомендуемая литература [203] ГЛАВА IX. ХРОМАТОГРАФИЯ БЕЛКОВ [204] A. Хроматография белков на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой [204] 1. Хроматография на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой в ОН*-форме [204] 2. ДЭАЭ-целлюлоза в Сl*-форме [205] 3. Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе в присутствии мочевины [207] Рекомендуемая литература [208] 4. Хроматография белков сыворотки на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой [209] Б. Хроматография белков на колонке с катионообменной целлюлозой [212] 1. КМ-целлюлоза [212] 2. Фракционирование белков сыворотки крови на колонке с фосфоцеллюлозой [214] 3. Фракционирование белков сыворотки крови на колонке с КМ-целлюлозой [215] B. Фракционирование белков сыворотки на колонке с ДЭАЭ-сефадексом [215] Г. Выделение IgG из сыворотки крови с помощью бесколоночноного фракционирования на ДЭАЭ-сефадексе [218] Рекомендуемая литература [219] ГЛАВА X. ГЕЛЬ-ФИЛЬТРАЦИЯ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ A. Обессоливание белковых растворов на колонке с сефадексом [220] Б. Концентрирование белковых растворов с помощью сефадекса [221] B. Фракционирование белков сыворотки гель-фильтрацией [222] Г. Разделение высокомолекулярных фрагментов гель-фильтрацией на колонке с сефадексом [223] Д. Предварительное фракционирование ферментативных гидролизатов на колонке с сефадексом G-50 [226] Е. Разделение белков непрерывно повторяющейся гель-фильтрацией [228] Рекомендуемая литература [230] ГЛАВА XI. ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ (Д. А. МЕДЬЕШИ) [231] А. Тонкослойная хроматография аминокислот и их производных [234] 1. ДНФ-аминокислоты [235] 2. ФТ Г-аминокислоты [236] 3. Дансиламинокислоты [237] 4. Пептиды [237] Б. Тонкослойная гель-фильтрация [238] Цитированная литература [241] Рекомендуемая литература [241] ГЛАВА XII. ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ В ФИКСИРОВАННОМ СЛОЕ ИОНООБМЕННИКА [242] Типы пластинок «Фиксион» [244] Применение пластинок «Фиксион 50 X 8» [244] Уравновешивание пластинок «Фиксион 50 X 8» [246] Нанесение проб [247] Приготовление раствора нингидрина [248] Области применения [250] Разделение ароматических и основных аминокислот [250] Анионообменная хроматография на пластинке «Фиксион» [261] Быстрое определение цистеина и цистина в форме цистеиновой кислоты в образцах растительного происхождения [262] Цитированная литература [264] ГЛАВА XIII. АНАЛИЗ КОНЦЕВЫХ ГРУПП И СТУПЕНЧАТАЯ ДЕГРАДАЦИЯ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ [265] A. Определение N-концевых групп 2,4-динитрофторбензольным методом [265] 1. Динитрофенилирование белков [266] 2. Гидролиз ДНФ-белка или ДНФ-пептида и экстракция ДНФ-производных [267] 3. Хроматография на бумаге ДНФ-аминокислот [268] 4. Идентификация ДНФ-аминокислот тонкослойной хроматографией [270] 5. Непрямая идентификация ДНФ-аминокислот [271] 6. Количественное определение ДНФ-производных [272] 7. Приготовление ДНФ-аминокислот [273] 8. Приготовление *-ДНФ-лизина [274] Б. Определение N-концевых аминокислот дансильным методом [274] Методика [275] Приготовление ДНС-аминокислот [281] B. Определение N-концевой аминокислотной последовательности в реакции с фенилизотиоцианатом [281] Г. Деградация белков с помощью ФТЦ [283] Д. Анализ последовательности аминокислот в пептидах методом Эдмана в дансильном варианте [284] Е. Определение последовательности аминокислот в пептидах деградацией по Эдману и количественным аминокислотным анализом [285] 1. Идентификация и определение ФТГ-производных [286] 2. Приготовление ФТГ-аминокислот [286] Ж. Определение N-концевой последовательности с помощью лейцинаминопептидазы [287] 3. Определение С-концов гидразинолизом [290] И. Определение С-концевой последовательности аминокислот с помощью карбоксипептидазы [291] Цитированная литература [293] ГЛАВА XIV. ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРОИЗВОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ. СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ. ВОЗМОЖНОСТИ И ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА (Р. Кайзер и А. Прокс) [294] Введение [294] Принцип метода [295] Методика [296] Специальные требования к приборам и экспериментальные условия ГХ-анализа производных аминокислот и пептидов [302] Газовые хроматографы для аминокислотного анализа и требования, предъявляемые к ним [306] Количественная оценка газовых хроматограмм [307] Свойства производных аминокислот [309] Получение производных аминокислот [311] Получение производных аминокислот путем защиты функциональных групп [311] Образование производных при химическом превращении аминокислот [324] Образование производных при деградации аминокислот [326] Пиролиз аминокислот [327] Газовая хроматография производных аминокислот [328] Проблемы количественного анализа аминокислот [335] Газовая хроматография пептидов [337] Метод Бимана и др. [339] Метод Вейганда и др. [341] Цитированная литература [352] Предметный указатель [355] |
Формат: | djvu |
Размер: | 3072799 байт |
Язык: | РУС |
Рейтинг: | 430 |
Открыть: | Ссылка (RU) |