Аффинная хроматография
Автор(ы): | Туркова Я.
06.10.2007
|
Год изд.: | 1980 |
Описание: | Книга посвящена новому методу хроматографии, развиваемому многими ведущими лабораториями мира и являющемуся весьма перспективным в области химии белка, энзимологии и иммунологии. Он позволяет изолировать необходимое вещество в активном состоянии, с высокой степенью очистки и со значительно большей эффективностью по сравнению с другими видами хроматографии. |
Оглавление: |
Обложка книги.
От переводчика [5]Предисловие автора к русскому изданию [7] Глава 1. Введение [9] Список литературы [13] Глава 2. Принцип метода аффинной хроматографии, историческая справка и применение [15] Список литературы [19] Глава 3. Теория аффинной хроматографии [20] 3.1. Теоретические рекомендации, выведенные из рассмотрения равновесной модели [20] 3.1.1. Равновесная модель для сорбции с постоянной константой связывания [20] 3.1.2. Равновесная модель для элюирования путем изменения K(?) [26] 3.1.3. Равновесная модель для элюирования конкурентным ингибитором [30] 3.1.4. Математическое моделирование результатов колоночной хроматографии [32] 3.1.5. Заключение [34] 3.2. Теория кооперативного связывания в рамках теории тарелок [36] 3.2.1. Изотерма связывания олигоадениловой кислоты с полиуридиловой кислотой [36] 3.2.2. Кооперативная адсорбционная колоночная хроматография [38] 3.2.3. Характерные особенности кооперативных адсорбционных хроматограмм [40] 3.3. Статистическая теория хроматографии применительно к аффинной хроматографии [43] Список литературы [43] Глава 4. Применение аффинной хроматографии для количественной оценки специфического комплексообразования [44] 4.1. Определение констант диссоциации по данным элюирования [45] 4.2. Определение констант диссоциации по данным фронтального анализа [51] 4.3. Кооперативное элюирование олигоадениловой кислоты в хроматографии на иммобилизованной полиуридиловой кислоте [55] 4.4. Другие методы количественной оценки взаимодействий с иммобилизованными аффинными лигандами [58] Список литературы [61] Глава 5. Общие вопросы связывания иа аффинном сорбенте [62] 5.1. Стерическая доступность [64] 5.2. Конформация присоединенного аффинанта [73] 5.3. Концентрация аффиианта на матрице [75] 5.4. Концентрация белков, время уравновешивания и скорость потока [81] 5.5. Влияние температуры [86] 5.6. Влияние рН и ионной силы [90] 5.7. Элюирование конкурентными аффинными лигандами [92] 5.8. Неспецифические влияния [94] 5.8.1. Влияние на неспецифическую сорбцию ионной силы [94] 5.8.2. Применение теории Дебая—Хюккеля при изучении зависимости константы равновесия адсорбции и скорости десорбции фермента с замещенных гелей от ионной силы [96] Список литературы [102] Глава 6. Выбор аффинных лигандов [104] 6.1. Высокоспецифичные сорбенты и сорбенты с групповой специфичностью [104] 6.2. Выделение ферментов, ингибиторов и кофакторов [108] 6.3. Иммуноаффинная хроматография [114] 6.4. Выделение лектинов, гликопротеииов и сахаридов [116] 6.5. Выделение рецепторов. Связывание и транспорт белков [122] 6.6. Выделение SH-белков и пептидов [124] 6.7. Выделение специфических пептидов [126] 6.8. Выделение нуклеиновых кислот и нуклеотидов [130] 6.9. Выделение липидов, гормонов и других веществ [133] 6.10. Выделение клеток и вирусов [135] 6.11. Продажные нерастворимые аффинные сорбенты [137] Список литературы [148] Глава 7. Гидрофобиаи хроматография, ковалеитиая аффинная хроматография, аффинное элюирование и родственные методы [151] 7.1. Гидрофобная хроматография [151] 7.2. Ковалентная аффинная хроматография [158] 7.3. Аффинное элюирование [160] 7.4. Аффинная пертурбация плотности [165] 7.5. Аффинный электрофорез [166] 7.6. Металлохелатная аффинная хроматография [170] Список литературы [172] Глава 8. Нерастворимые носители и наиболее распространенные методы иммобилизации лиганда [174] 8.1. Требования, предъявляемые к характеристикам носителей [175] 8.2. Обзор наиболее распространенных нерастворимых носителей и методов присоединения к ним [177] 8.2.1. Целлюлоза и ее производные [177] 8.2.2. Диальдегидкрахмал—метилендианилин (К—МДА) [181] 8.2.3. Декстраиовые гели [183] 8.2.4. Агароза и ее производные [184] 8.2.5. Сополимер этилена и малеинового ангидрида [199] 8.2.6. Полиакриламидные носители и их производные [200] 8.2.7. Оксиалкилметакрилатные гели [205] 8.2.8. Стекло и его производные [208] 8.2.9. Другие носители [210] 8.3. Пространственные группы [210] 8.4. Блокирование непрореагировавшнх групп [216] 8.5. Десорбция присоединенного аффинного лиганда [219] 8.6. Общие замечания, касающиеся выбора сорбентов, пространственных групп и методов связывания и блокирования [225] Список литературы [232] Глава 9. Характеристика носителей и иммобилизованных аффинных лигандов [236] 9.1. Методы определения неспецифической сорбции [237] 9.1.1. Определение адсорбционной емкости [237] 9.1.2. Определение остаточных отрицательно заряженных групп [237] 9.2. Определение активируемых и активных групп [238] 9.2.1. Определение карбоксильных, гидразвдных и амннных групп кислотно-основным титрованием [238] 9.2.2. Определение свободных карбоксильных групп [239] 9.2.3. Определение свободных аминогрупп в полимерах путем конденсации с 2-окси-1-нафтальдегидом [239] 9.2.4. Определение азидных групп [239] 9.2.5. Цветная реакция с 2,4,6-тринитробензолсульфонатом натрия [240] 9.2.6. Флуорескамшювый метод быстрого определения следовых количеств аминогрупп [241] 9.2.7. Определение окснрановых групп [241] 9.2.8. Определение емкости эфирных n-нитрофенильных производных оксиалкилметакрилатных гелей (НФОМ) [242] 9.2.9. Определение степени замещения бензилировэнной сефарозы, сшитой дибромпропанолом [242] 9.2.10. Определение вннильных групп [242] 9.2.11. Определение сульфгидрильных групп [243] 9.3. Определение иммобилизованных аффинных лигандов [243] 9.3.1. Дифференциальный анализ [244] 9.3.2. Спектрофотометрические методы [244] 9.3.3. Кислотно-основное титрование [246] 9.3.4. Определение иммобилизованных белков, пептидов, аминокислот, нуклеотндов, углеводов и других веществ после их освобождения с помощью кислотного, шелочного или ферментативного гидролиза [247 9.3.5. Определение количества связанного аффинного лиганда элементным анализом [248] 9.3.6. Определение меченых аффинных лигандов [249] 9.3.7. Колориметрическое определение иммобилизованного днаминопропиламина с ниигидрином [249] 9.3.8. Определение иммобилизованных белков по содержанию триптофана [249] 9.4. Титрование активных центров иммобилизованных протсиназ [250] 9.5. Исследование конформационных изменений иммобилизованных белков [253] 9.6. Распределение белков, связанных с нерастворимыми носителями [255] Список литературы [256] Глава 10. Общие вопросы сорбции, элюироваиия н иеспецифического связывания [258] 10.1. Условия сорбции [258] 10.1.1. Влияние температуры, рН и солей [259] 10.1.2. Практические указания для проведения сорбции [264] 10.2. Условия элюирования [266] 10.2.1. Практические указания для проведения десорбции [267] 10.2.2. Влияние гетерогенности иммобилизованных аффинных лигандов [272] 10.2.3. Установление оптимальных условий и эффекта насыщения [275] 10.3. Неспецифическаи сорбция [276] 10.4. Регенерация и хранение аффинных колонок [279] Список литературы [280] Глава 11. Примеры применения аффинной хроматографии [282] 11.1. Выделение биологически активных веществ [367] 11.2. Разделение D,L-триптофана аффинной хроматографией на колонке с иммобилизованным на агарозе бычьим сывороточным альбумином [367] 11.3. Полусинтетическая нуклеаза и комплементарное взаимодействие нуклеотидных фрагментов [368] 11.4. Изучение взаимодействий биологически активных веществ [371] 11.5. Исследование механизмов действия ферментов [374] 11.6. Молекулярная структура интерферонов фибробластов и лейкоцитов, исследованная аффинной хроматографией с лектинами и гидрофобной хроматографией [377] 11.7. Иммуноанализ [380] 11.7.1. Твердофазный радиоиммуноанализ [380] 11.7.2. Анализ на иммуносорбеите со связанным ферментом (ЭЛИСА) [382] 11.7.3. Микрофлуориметрический иммуноанализ [383] 11.8. Специфическое удаление антител к бычьему сывороточному альбумину (БСА) in vivo с помощью экстракорпорального протока через БСА, иммобилизованный на найлоновых микрокапсулах [383] Список литературы [385] Глава 12. Иммобилизованные ферменты [420] 12.1. Классификация иммобилизованных ферментов [420] 12.2. Присоединение ферментов к нерастворимым носителям и активность иммобилизованных ферментов [422] 12.3. Стабильность иммобилизованных ферментов [431] 12.3.1. Устойчивость при хранении [432] 12.3.2. Зависимость устойчивости от рН [433] 12.3.3. Термическая устойчивость [433] 12.3.4. Устойчивость к денатурирующим агентам [434] 12.3.5. Повышение устойчивости [436] 12.4. Применение иммобилизованных ферментов [436] 12.4.1. Аффиниые лиганды [436] 12.4.2. Исследование стабилизированных молекул ферментов и их субъединиц [437] 12.4.3. Модели биологических систем [439] 12.4.4. Применение иммобилизованных ферментов [441] 12.5. "Синтетическая биохимия" [443] Список литературы [444] Дополнения [447] Предметный указатель хроматографируемых веществ [453] Предметный указатель [458] |
Формат: | djvu |
Размер: | 9350696 байт |
Язык: | RUS |
Рейтинг: | 331 |
Открыть: | Ссылка (RU) |